荔枝( Litchi chinensis Sonn.) 為無患子科荔枝屬常綠喬木 植物的果實(shí),在我國主要產(chǎn)地為廣東、廣西、福建、海南等。 據(jù)報道,我國荔枝種植面積 為 53. 33 余 萬 hm2 ,年 產(chǎn) 量 約 200 萬 t 。目前人們對荔枝的研究主要在荔枝保鮮貯藏技 術(shù)方面,對荔枝加工也進(jìn)行了一些研究,但主要集中在荔 枝果肉的加工利用,加工的產(chǎn)品有荔枝干、荔枝飲料、荔枝罐 頭、荔枝酒等,但在荔枝加工過程中荔枝果皮、荔枝果核 一般作為廢棄物而丟棄,降低了荔枝的綜合利用率,造成資 源的極大浪費(fèi),還會污染環(huán)境。荔枝果皮、果肉和果核均含 有多酚物質(zhì),為荔枝主要功能成分之一,據(jù)報道荔枝酚類物 質(zhì)具有抗氧化、降血糖、抗腫瘤等重要生物活性。
1 材料與方法
1.1 原料和試劑
“淮枝”“糯米糍”“黑葉”“桂味”品種荔 枝皮,取自廣州市從化區(qū)明珠市場的荔枝整果。 沒食子酸( 中國食品藥品檢定研究院) 、福林酚( 中國食品藥品檢定研究院) 、95%乙醇( 分析純,天津市大茂化學(xué)試 劑廠) 、甲醇( 分析純,天津市大茂化學(xué)試劑廠) 、碳酸鈉( 分 析純,天津市大茂化學(xué)試劑廠) 。
1.2 主要儀器與設(shè)備
DMF-10A 多功能搖擺式粉碎機(jī)( 浙江溫嶺市銘大藥材機(jī)械設(shè)備有限公司) 、DMF-4B 手提式高 速中藥粉碎機(jī)( 浙江溫嶺市銘大藥材機(jī)械設(shè)備有限公司) 、 2WAJ 阿貝折射儀( 上海儀電物理光學(xué)儀器有限公司) 、LT- 1002 電子天平( 常熟市天量儀器有限責(zé)任公司) 、ATX224 分 析天平( 島津制作所) 、TD-5M 離心機(jī)( 山東博科科學(xué)儀器有 限公司) 、SP-752PC 紫外分光光度計(jì)( 上海光譜儀器有限公 司) 、5L 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器( 上海大顏儀器設(shè)備有限公司) 、EXRE- 2002 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器( 鞏義市宇翔儀器有限公司) 、DHG-9240A 電熱鼓風(fēng)干燥箱( 上海一恒科學(xué)儀器有限公司) 、一恒DZF-6053真空干燥箱( 上海一恒科學(xué)儀器有限公司) 。
1.3 荔枝皮原料篩選
將 4 種品種荔枝“淮枝”“糯米糍” “黑葉”“桂味”的皮、果肉、核進(jìn)行分離,冷藏保存,備用; 測 定荔枝皮多酚含量( 按干重計(jì)) ,以多酚含量為考察指標(biāo),確 定荔枝皮原料。
1.4 荔枝皮多酚提取工藝流程
新鮮荔枝皮 60 ℃烘 8 h、粉 碎成粗粉→水或乙醇提取→提取液過 300 目,除渣→濾液經(jīng) 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮( 60 ℃,- 0. 09 ~ - 0. 03 MPa) →濃縮液干燥 ( 60 ℃,-0.09~ -0.03 MPa) 。
1.5 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
準(zhǔn)確稱取( 0.110±0.010) g 沒食子酸,用蒸餾水溶解,然后定容至 100 mL,即為沒食子酸 標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。準(zhǔn)確量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 標(biāo)準(zhǔn)儲備 溶液置于 100 mL 容量瓶中,定容至刻度,搖勻,濃度分別為 10、20、30、40、50 μg /mL,即為沒食子酸工作液。準(zhǔn)確量取 1. 0 mL 沒食子酸工作液置于刻度試管中,分別加入 5.0 mL10%福林酚試劑,搖勻,反應(yīng) 3 ~ 8 min,加入 4.0 mL 7.5% Na2CO3 溶液,加水定容至刻度、搖勻,室溫下放置 60 min,于 765 nm 波長下使用紫外可見分光光度計(jì)測定吸光度( A) ,繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線。空白用蒸餾水代替沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
1.6 多酚含量的檢測
稱取 0.2 g 荔枝皮提取物干粉置于 10 mL 離心管中,加入 70 ℃預(yù)熱過的 70%甲醇溶液 5 mL,攪 拌均勻,立即移入 70 ℃水浴 10 min,冷卻至室溫,3 500 r/min 離心 10 min,將上清液轉(zhuǎn)移至 10 mL 容量瓶。沉淀中再加入 5 mL70%甲 醇 溶 液,重 復(fù) 以 上 操 作。合并提取液定容至 10 mL,搖勻,再準(zhǔn)確量取 1.0 mL 置于 100 mL 容量瓶中,搖勻, 待測??瞻子盟鏄悠罚溆嗖僮魍?ldquo;1.4”。在 765 nm 波長 下測定樣品吸光度,記錄并計(jì)算樣品提取物中多酚的含量。
1.7 荔枝皮多酚提取工藝優(yōu)化
采用溶劑萃取法提取荔枝 皮多酚。通過單因素試驗(yàn)考察提取溫度、乙醇濃度、料液比、 提取時間等因素對荔枝皮提取物多酚含量的影響。 在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,選取對荔枝皮提取物多酚 含量影響較大的幾個因素,3 個因素 3 個水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn), 探究各提取條件對荔枝皮多酚含量的影響,通過正交試驗(yàn)探 討荔枝皮多酚的最佳提取工藝條件。
2 結(jié)果與分析
測定淮枝、糯米糍、黑葉、桂味 4 種品 種荔枝皮的多酚含量( 按干重計(jì)) , “淮枝”荔枝皮的多酚含量明顯高于其他 3 個品種,且市面上 “淮枝”荔枝的價格較低,成本低,因此“淮枝”荔枝皮為該試 驗(yàn)最佳原料。準(zhǔn)確稱取 100 g 干燥荔枝皮粉碎粗粉 5 份,置于恒溫水浴鍋中,提取溫 度分別設(shè)為 30、40、50、60、70 ℃,料液比 1 ∶6( g ∶mL) ,50%乙 醇提取 2 次,第 1 次提取 60 min,第 2 次提取 60 min,不同提 取溫度對多酚含量的影響,隨著提取溫 度的增加,多酚含量呈緩慢增長后降低的趨勢,最佳提取溫 度為 60 ℃。溫度升高能加快分子的運(yùn)動速率,有利于提取溶劑進(jìn)入荔枝皮組織的內(nèi)部,加快多酚的溶出,但當(dāng)達(dá)到一 定濃度時,達(dá)到平衡后提取多酚量不再增加,其他雜質(zhì)的溶 出增加,多酚的含量會有所下降。準(zhǔn)確稱取 100 g 干燥荔枝皮粉碎粗粉 5 份,置于恒溫水浴鍋中,乙醇濃 度分別設(shè)為 0、20%、40%、60%、80%,料液比 1 ∶6( g ∶mL) ,提 取溫度 50 ℃,提取 2 次,第 1 次提取時間 60 min,第 2 次提取 時間 60 min,不同乙醇濃度對多酚含量的影響,隨著乙醇濃度的增加,多酚含量呈現(xiàn)先增后減的趨勢, 60%乙醇為最佳提取溶劑。當(dāng)乙醇濃度超過 60%以后,隨著 乙醇濃度的增加,多酚含量降低,這可能是因?yàn)橹苄晕镔|(zhì) 的溶出量也逐漸增大,雜質(zhì)增多,干擾因素也隨之增加,從而 使多酚含量有所減小。
3 結(jié)論與討論
3.1 結(jié)論
該試驗(yàn)通過對荔枝皮多酚的提取工藝進(jìn)行研究, 結(jié)果表明用溶劑浸提法提取荔枝皮多酚,提取溫度、乙醇濃 度、料液比和提取時間都是影響荔枝皮多酚含量的重要因 素。荔枝皮多酚提取的最優(yōu)工藝如下: 提取溫度 70 ℃,乙醇 濃度 60%,料液比 1 ∶7,第 1 次提取時間 40 min,各因素對荔 枝皮提取物多酚含量的影響從大到小依次為乙醇濃度、提取 溫度、料液比、提取時間。
3.2 討論
隨著荔枝種植面積的增大,荔枝產(chǎn)量的逐年增 加,荔枝果皮作為荔枝深加工過程中產(chǎn)生的大宗量農(nóng)廢產(chǎn)品 未能得到充分利用。為了充分合理應(yīng)用荔枝果皮,近年來人 們逐漸對荔枝皮多酚提取工藝進(jìn)行研究。喬小瑞等研究 了荔枝殼粗多酚的提取工藝,結(jié)果表明當(dāng)料液比為 13 ∶1,浸 提體積分?jǐn)?shù)為 64%,浸提時間為 78 min 時,荔枝殼多酚提取 率為 5.92%。趙文華等采用萃取法聯(lián)合超聲-微波輔助提 取荔枝殼中的多酚物質(zhì),研究確定了多酚物質(zhì)最佳提取工藝 條件,液固比、乙醇濃度、提取溫度、提取時間分別為 20%、 60%、45 ℃、10 min,此最佳提取條件下多酚物質(zhì)的提取得率為 1.68%。該試驗(yàn)研究荔枝皮多酚的提取工藝,結(jié)果表明荔 枝皮多 酚 提 取 物 得 率 為 13. 70%,荔枝皮多酚含量高達(dá) 5. 40%,顯示了工藝比較理想、可靠,下一步可對荔枝皮提取 物多酚的穩(wěn)定性及純化進(jìn)行深入探究,并進(jìn)一步考察工藝的 穩(wěn)定性,最后從藥理活性和最終劑型等方面進(jìn)行深入考慮分析。
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