風(fēng)濕痹痛膏由甘肅省名中醫(yī)何天有《何氏藥物輔 灸療法》中的“風(fēng)濕痹痛散”衍化而來，以該方為 基礎(chǔ)，結(jié)合現(xiàn)代研究及臨床實(shí)踐，加土鱉蟲、馬錢子 等，處方由制草烏、炒白芍、醋延胡索、雷公藤等 7 味藥組成，具有祛風(fēng)散寒、勝濕止痛、舒筋活絡(luò)、活 血通絡(luò)功效。

1 儀器與試藥

Agilent 1100 Series 型高效液相色譜儀（美國(guó) Agilent 科技有限公司），DAD 檢測(cè)器；BSA224S 電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；BT125D 型十 萬分之一電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）； Milli-Q 超純水系統(tǒng)（德國(guó)墨克生命科學(xué)公司）；KDM 型調(diào)溫電熱套（山東鄄城華魯電熱儀器有限公司）； KQ-500DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有 限公司）；SHB-ⅢA 循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城 科工貿(mào)有限公司）；一恒DHG-9240A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥 箱（上海一恒科技有限公司）。 制草烏、黑順片、土鱉蟲、醋延胡索、雷公藤、 制馬錢子、炒白芍飲片均購(gòu)自蘭州佛慈養(yǎng)生堂，經(jīng)甘 肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院楊錫倉(cāng)主任中藥師鑒定，符合 2015 年版《中華人民共和國(guó)藥典》各藥項(xiàng)下規(guī)定。芍 藥苷、苯甲酰烏頭堿、苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰次 烏頭堿原堿對(duì)照品（HPLC 純度≥98.00%，批號(hào)分別為 CHB160512、CHB170324、CHB171203、CHB170324）， 成都克洛瑪生物科技有限公司；乙腈、甲醇均為色譜 純；95%乙醇為分析純；水為超純水（Milli-Q 超純水 系統(tǒng)制備）。

2 方法與結(jié)果

2.1 評(píng)價(jià)指標(biāo)的建立

2.1.1 出膏率

將處方水提液濃縮至稠浸膏，按 2015 年版《中 華人民共和國(guó)藥典》（四部）通則 0601 相對(duì)密度測(cè)定 法第一法比重瓶法、0831 干燥失重測(cè)定法測(cè)定比重及 干燥失重，計(jì)算出膏率。

2.1.2 芍藥苷含量測(cè)定

2.1.2.1 色譜條件

參照 2015 年版《中華人民共和國(guó)藥典》（一部） 炒白芍項(xiàng)下含量測(cè)定方法，采用 Aglient Extend SBC18 色譜柱，流動(dòng)相為 0.1%磷酸-乙腈（86∶14），柱 溫 25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng) 230 nm，流速 1.0 mL/min，進(jìn)樣 量 10 μL。

2.1.2.2 對(duì)照品溶液制備

精密稱取芍藥苷對(duì)照品 25.00 mg，置 25 mL 容量 瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得 1.00 mg/mL 的芍藥 苷對(duì)照品溶液。

2.1.2.3 供試品溶液制備

取提取浸膏適量，精密稱定，加 50%甲醇 50 mL， 超聲處理（功率 300 W，頻率 50 kHz，溫度 25 ℃） 20 min，用 0.45 μm 微孔濾膜過濾，即得。

2.1.2.4 陰性對(duì)照溶液制備

取處方中除炒白芍外的其他藥物飲片，按提取工 藝制備，得炒白芍陰性對(duì)照品，按供試品溶液制備方 法制備，即得。

2.1.2.5 專屬性試驗(yàn)

精密吸取上述對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì) 照溶液各 10 μL，注入高效液相色譜儀測(cè)定，結(jié)果陰 性對(duì)照無干擾，表明方法專屬性好。

2.1.2.6 線性關(guān)系考察

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液 1、2、4、6、8 mL， 置 10 mL 容量瓶中，加甲醇定容至刻度線，以濃度對(duì) 峰面積進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y＝10 428X＋263.48 （r＝0.999 5），表明芍藥苷在 0.005～0.800 mg/mL 范 圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.1.2.7 精密度試驗(yàn)

精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣 6 次，測(cè) 定并計(jì)算芍藥苷峰面積，結(jié)果 RSD＝0.57%，表明儀 器精密度良好。

2.1.2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取 1 號(hào)樣品 6 份，制備供試品溶液，按上 述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果芍藥苷含量 RSD＝1.62%， 表明該方法重復(fù)性良好。

2.1.2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱取 1 號(hào)樣品，制備供試品溶液，按上述色 譜條件，分別于 0、0.5、2、4、8、12、24 h 測(cè)定， 結(jié)果芍藥苷峰面積 RSD＝1.13%，表明供試品溶液在 24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.2.10 加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取 1 號(hào)樣品適量，共 6 份，置 50 mL 量瓶 中，按 1∶1 比例加入對(duì)照品適量，制備供試品溶液， 按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果平均回收率為102.5%， RSD＝1.73%。

2.1.2.11 樣品測(cè)定

將正交試驗(yàn)所得浸膏樣品按上述方法制備供試 品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣分析，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 各樣品中芍藥苷含量。

3 討論

發(fā)現(xiàn)風(fēng)濕痹痛膏中單酯型烏頭堿轉(zhuǎn)移率 略低，可能是復(fù)方中藥物配伍相互影響所致。有研究 顯示，川烏與白芍共煎后，烏頭堿煎出量降低，芍藥 苷煎出量增加，與本研究結(jié)果一致。中藥復(fù)方成 分復(fù)雜，優(yōu)選提取工藝不能以單一成分作為指 標(biāo)，目前多以指標(biāo)成分含量、出膏率、藥理活性 等多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)優(yōu)選工藝參數(shù)。本方中白芍用量較 大，鎮(zhèn)痛作用較強(qiáng)，因此選擇芍藥苷含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)。 制草烏為方中君藥，具有祛風(fēng)除濕功效，烏頭堿為其 有效成分，炮制后主要含單酯型生物堿，故選其作為 評(píng)價(jià)指標(biāo)。此外，出膏率是控制制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)， 用于控制提取藥液的濃縮程度。因此，本研究綜合選 用上述指標(biāo)，可較合理地評(píng)價(jià)風(fēng)濕痹痛膏的提取工 藝。AHP-CRITIC 混合加權(quán)法綜合考慮主客觀兩方面 因素，克服了單一方法賦權(quán)的主觀性和片面性。 可為風(fēng)濕痹痛膏的水提工藝建立較為全面、合理的綜 合評(píng)價(jià)體系。



 

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