1 材料與方法 

1.1 材料與試劑 

紅酵母，吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食品微生物實(shí)驗(yàn)室 在吉林省長春市凈月區(qū)的土壤中分離鑒定提供，并 保藏命名為 CCYZ116。 斜面培養(yǎng)基：200 g/L 馬鈴薯，20 g/L 葡萄糖， 20 g/L 瓊脂。 液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基：10 g/L 蛋白胨，10 g/L 酵母浸 粉，40 g/L 葡萄糖。裝液量為 50 mL 于 250 mL 三角 瓶中。 固態(tài)培養(yǎng)基：將酒糟、豆粕和麩皮研 磨 至 40 目，酒糟∶豆粕∶麩皮配比為 1∶3∶2，按比例 稱好培養(yǎng)基，均勻攪拌，分別取 50 g 置于 500 mL 燒 杯中，封口包扎，于 121 ℃下滅菌 40 mi。 

1.2 儀器與設(shè)備 

MLS- 3780 型高壓蒸汽滅菌鍋，日本 Sanyo 公司 產(chǎn)品；HZQ- X100 型全溫振蕩培養(yǎng)箱、DHP- 9272 型 電熱恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科技有限公司產(chǎn)品；Cary 300 型紫外可見光分光光度計(jì)，美國 Varian 公司產(chǎn) 品；Evolution RC 型高速冷凍離心機(jī)，美國 Thermo Stovall 公司產(chǎn)品；DL- CJ- 2ND 型超級潔凈工作臺， 北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司產(chǎn)品。 

1.3 方法 

CCYZ116 種子培養(yǎng)：在 CCYZ116 斜面上挑取菌 落，接種于液體培養(yǎng)基中。溫度為 30 ℃，以轉(zhuǎn)速 230 r/min 振蕩培養(yǎng) 48 h。 接種量不同處理： （1） 空白組。接入 15 mL 滅菌蒸餾水為空白對照，于 30 ℃下培養(yǎng) 72 h。 （2） 原液培養(yǎng)組。將 15 mL CCYZ116 液體發(fā)酵 液離心，棄上清，用 15 mL 滅菌蒸餾水水重懸接入 固體培養(yǎng)基中，于 30 ℃下培養(yǎng) 72 h。 （3） 2.5 倍濃縮培養(yǎng)組。將 37.5 mL CCYZ116 液 體發(fā)酵液離心，棄上清，用 15 mL 的滅菌蒸餾水水 重懸接入固態(tài)培養(yǎng)基，于 30 ℃下培養(yǎng) 72 h。 （4） 5 倍濃縮培養(yǎng)組。將 75 mL CCYZ116 液體 發(fā)酵液離心，棄上清，用 15 mL 的滅菌蒸餾水水重 懸接入固態(tài)培養(yǎng)基，于 30 ℃下培養(yǎng) 72 h。

2 結(jié)果與分析

5 倍濃縮組的培養(yǎng)基中的活菌數(shù)最 高達(dá)到了 3.64×108 CFU/g，菌體生物量最高達(dá)到 2.644 g/L；2.5 倍濃縮組的活菌數(shù)為 3.60×108 CFU/g， 菌體生物量最高達(dá)到了 2.699 g/L，兩組之間沒有顯 著差異。但與原液培養(yǎng)組和空白組比較差異顯著 （p<0.05）。結(jié)果表明，接種量的增加，顯著提高了 培養(yǎng)基的活菌數(shù)量和菌體生物量，但濃縮倍數(shù)達(dá)到 2.5 倍時(shí)對活菌數(shù)量和菌體生物量的影響已飽和，不 是接菌量越大活菌數(shù)量就越高。在實(shí)際發(fā)酵應(yīng)用中 可適當(dāng)加大接菌量，達(dá)到飽和點(diǎn)后無需再繼續(xù)加大 接菌量，既可提高發(fā)酵效率，又能降低成本。

3 結(jié)論 

利用從土壤中分離出一株紅酵母的發(fā)酵作用來增 加農(nóng)林廢棄物的營養(yǎng)成分。研究不同接種量的 CCYZ116 固態(tài)發(fā)酵后農(nóng)林廢棄物培養(yǎng)基中菌體生長和 營養(yǎng)成分的變化。2.5 倍濃縮組與空白組、原液組相比 顯著地提高了培養(yǎng)基中活菌數(shù) （3.64×108 CFU/g） 和 生物量 （2.699 g/L，p<0.05）。5 倍濃縮組的類胡蘿卜 素含量 （713.22 μg/g） 和產(chǎn)量 （1 312.3 μg/L） 最高， 2.5 倍濃縮組的可溶性總糖最高達(dá) 5.433 g/100 g，原液 組的可溶性蛋白含量最高為 10.392 g/100 g（p<0.05）。 由此可見，提高紅酵母的接種量，有助于提高 紅酵母發(fā)酵產(chǎn)物的營養(yǎng)價(jià)值、提高發(fā)酵效率、降低 成本，為農(nóng)林廢棄物回收利用和紅酵母實(shí)際應(yīng)用的 進(jìn)一步研究和開發(fā)提供了理論依據(jù)。

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