生姜,是姜屬植物 姜(ZinggiberOfcinaleRosc)的 根莖。在日常生活中,主要作為一種常見的香辛料被 廣泛使用。生姜中含有多種生物化學(xué)成分,包括揮發(fā) 性的姜精油以及具有刺激性氣味的姜酚、姜辣素、姜酮 等,具有抗氧化、清除人體內(nèi)自由基,降血糖、降低膽固 醇、抗炎、抑菌、抗腫瘤、抗過敏等功效。鮮姜汁是無硫 鮮姜去皮洗凈后,研磨過濾而得到的金黃色半透明液 體,有濃郁姜香味,充分保留生姜中的活性物質(zhì)和獨(dú)特 氣味,是天然的食品添加劑和防腐劑。
1 材料與方法
1.1 材料與設(shè)備
酵母菌株:W.anomalusJ7-2,山西師范大學(xué)生物 工程實(shí)驗(yàn)室 保 藏;無 硫 生 姜:購(gòu) 于 臨 汾 市 堯 都 區(qū) 堯 豐市場(chǎng)。 試劑:PDA 培養(yǎng)基、瓊脂粉,北京奧博星生物技術(shù) 有限責(zé)任公司;DPPH,ABTS,TPTZ、水溶性維生素 E, 北京伊諾凱科技有限公司;甲醇,冰醋酸,水合乙酸鈉, 過硫酸鉀,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;FeCl3 · 6H2O,天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司。(以上所有試劑,無特別說明外,均為分析純)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備:電子天平,上海精科;LDZX-50KBS立 式壓力蒸汽滅菌鍋,上海申安醫(yī)療器械廠;SW-CJ- 2FD型超凈工作臺(tái),上海博訊;HPX-9272MBE型數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱,上海一恒;5804R 型高速冷凍離心機(jī), 德國(guó)基因有限公司;HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋,江蘇 金壇榮華儀器制造有限公司;752N 型紫外可見分光光 度計(jì),上海儀電分析儀器有限公司。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 鮮姜汁制備
取適量無硫鮮姜,去皮洗凈,晾干后切成小塊,混 入少量石英砂,用研缽研磨成汁,400目紗布過濾后即 得到生姜原液。將生姜原液與水按照1∶4比例進(jìn)行稀 釋,攪拌混勻后,將鮮姜汁置于冰箱中,4℃冷藏,備用。
1.2.2 酵母菌種活化及種子液制備
取上述 W.anomalusJ7-2酵母菌株,將其接種于 PDA 液體培養(yǎng)基中,28℃恒溫培養(yǎng)48h,將新活化的酵 母菌株恒溫培養(yǎng)至生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期,控制 OD600吸光值約為 0.8±0.01。
2 結(jié)果與討論
在 20mLPDA 液 體 培 養(yǎng) 基 中 分 別 添 加 200μL、 220μL、240μL、260μL、280μL、300μL、320μL、340μL、 360μL、380μL、400μL鮮姜汁,接種1%種子液,28℃下 發(fā)酵48h后 測(cè) 定 總 抗 氧 化 活 性。結(jié) 果 表 明,在 220- 300μL姜汁添加量范圍內(nèi),隨著姜汁添加量的增加,總 抗氧化活性無明顯變化;在320-360μL范圍內(nèi)總抗氧 化 活 性 隨 著 姜 汁 添 加 量 的 增 加 而 增 加,在 添 加 量 為 360μL時(shí)達(dá)到最大值,為3340.95±169.05μmolTE/g Gingerjuice;當(dāng)添加量大于360μL時(shí),總抗氧化活性開 始下降,可能是由于姜汁添加量過多,酵母生長(zhǎng)受到抑 制,從而抗氧化活性降低。因此選擇360μL 姜汁添加 量進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。在20mLPDA 液體培養(yǎng) 基 中 添 加 360μL 鮮 姜 汁, 接種 1% 種 子 液,分 別 置 于 20℃、25℃、30℃、35℃、 40℃溫度下培養(yǎng)48h后測(cè)定總抗氧化活性。測(cè)試結(jié)果 表明,隨著溫度的升高,姜汁的抗氧化活性逐漸增強(qiáng); 當(dāng)培養(yǎng) 溫 度 為 30℃ 時(shí),姜 汁 抗 氧 化 活 性 最 強(qiáng),達(dá) 到 4759.72±237.99μmolTE/gGingerjuice;當(dāng)溫度高于 30℃后,姜汁抗氧化活性明顯下降,說明該溫度下酵母 代謝受 到 抑 制,導(dǎo) 致 總 抗 氧 化 活 性 下 降。因 此 選 擇 30℃作為發(fā)酵溫度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
3 結(jié)論
通過 W.anomalusJ12-7酵母菌發(fā)酵鮮 姜汁,測(cè)定發(fā)酵后姜汁的抗氧化活性;通過單因素試驗(yàn) 及響應(yīng)面優(yōu)化確定 W.anomalusJ12-7的最佳發(fā)酵條 件為:20mLPDA 液體培養(yǎng)基中添加381μL鮮姜汁,接 種1%種子液,28.7℃溫度下培養(yǎng)60h,發(fā)酵后的姜汁 總抗氧化 活 性 較 發(fā) 酵 前 提 高 約 63.67%。結(jié) 果 表 明, W.anomalusJ12-7可以有效提升鮮姜汁的抗氧化活 性,改善發(fā)酵風(fēng)味,在食品工業(yè)中,可用于生產(chǎn)具有高 抗氧化 活 性 的 生 姜 保 健 黃 酒 及 其 一 系 列 高 附 加 值 產(chǎn)品。
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