材料與方法
SVE-6A1 超凈工作臺:新加坡 ESCO 公 司;GHP-9050 恒溫培養(yǎng)箱:上海一恒儀器股份有限公司;DM 2500 顯微鏡:德國 LEICA 公 司;HV-110 高壓滅菌器:日本 Hirayama 公司; U410-86 超低溫冰箱:英國 NEW BRUNSWICK 公司;U-2900 紫外分光光度計(jì):日本 Hitachi 公司;Vitek 2 Compact 全自動微生物分析系統(tǒng), YST 鑒定卡,ANC 鑒定卡:均購自法國梅里埃 公司。樣品采集:采集不同地區(qū)的自制發(fā)酵面包、 面團(tuán),共 5 份樣品。低溫冷鏈帶回實(shí)驗(yàn)室,較短 的時(shí)間內(nèi)及時(shí)進(jìn)行菌株分離。 樣品處理:取出采集樣品浸泡在 0.9% 生理 鹽水中,用無菌玻璃棒研碎樣品,分別在 3h、6h 后蘸取浸泡液劃線分離。
結(jié)果與討論
從額爾右納河流域 3 個(gè)地區(qū)共采集了 5 份傳 統(tǒng)列巴面團(tuán)樣品,經(jīng)分離共獲得菌株 30 株,其 中包含 14 株乳酸菌和 16 株酵母菌。篩選活力較 好且能穩(wěn)定傳代的 8 株酵母菌和 7 株乳酸菌進(jìn)行 形態(tài)學(xué)觀察、生物學(xué)鑒定,并從中篩選出具有潛 在共生的菌株。酵母菌在 YPD 平板培養(yǎng)基上呈現(xiàn)乳白色圓 形菌落,菌落直徑 0.91 ~ 3.28mm 大小不等、表 面光滑且邊緣整齊(個(gè)別邊緣不整齊)、中間凸 起,不透明或半透明。梅里埃 Vitek 2 Compact 全自動微生物分析系 統(tǒng),可在較短的時(shí)間內(nèi)鑒定菌種,酵母菌 YST 鑒 定卡可在 20h 內(nèi)出具詳細(xì)的鑒定分析報(bào)告。同樣,乳酸桿菌 ANC 鑒定卡要求鑒定可信 度在 85% ~ 99% 之間,經(jīng)鑒定,7 株乳酸菌的鑒 定可信度均大于 90%,是可接受的鑒定結(jié)果。目 前對乳酸菌的鑒定最常用的方法是 16S rDNA 測 序法,分子生物學(xué)方法雖然快速,但所需儀器和 試劑昂貴,檢測成本較高。
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