傳 統(tǒng) 動(dòng) 物 類 中 藥 美 洲 大 蠊為昆蟲綱有翅亞綱蜚蠊目蜚蠊科大 蠊屬昆蟲,又稱“蜚蠊”,是現(xiàn)今最古老、適應(yīng)性和 生命力最強(qiáng)的昆蟲類動(dòng)物之一,是蟑螂中目前能入 藥的唯一品種。美洲大蠊作為藥用,主血瘀癥堅(jiān)寒熱,破積聚,喉咽痹,內(nèi)寒, 無子。Ultimate 3000 毛細(xì)管高效液相色譜儀、Q ExactiveTM Hybrid Quadrupole-OrbitrapTM 電噴霧-組 合型離子阱 Orbitrap 質(zhì)譜儀,美國 Thermo Fisher Scientific 公司;Concentrator plus 真空離心濃縮儀, 德國 Eppendorf 公司;Sartorius BP211d 分析天平, 瑞士 Sartorius 公司;Microfuge 22R Centrifuge 低溫 高速離心機(jī),美國 Beckman Coulter 公司;BPH-9042 恒溫培養(yǎng)箱,上海一恒科學(xué)儀器有限公司。
色譜法能夠高效分離純化多肽, 是目前動(dòng)物多肽分離純化的主要技術(shù)手段。多肽分 離技術(shù)的發(fā)展帶動(dòng)了多肽序列結(jié)構(gòu)研究,多肽結(jié)構(gòu) 的鑒定有助于了解活性多肽作用機(jī)制,有助于促進(jìn) 活性多肽的開發(fā)利用。多肽鑒定方法包括 N 末端序 列測定法、質(zhì)譜法、核磁共振法。質(zhì)譜法通過測定 離子質(zhì)荷比完成分析,通過質(zhì)譜圖確定被測物質(zhì)量, 具有快速、高靈敏度的優(yōu)勢(shì)。使用超濾膜初步分離出美洲大蠊中相對(duì) 分子質(zhì)量小于 3000 的多肽組分,采用毛細(xì)管高效液 相色譜法對(duì)多肽進(jìn)一步純化,使用 Q-Exactive UHMR 混合四極軌道測量質(zhì)譜儀鑒定出來自于美 洲大蠊離子通道蛋白、卵黃蛋白原等前體蛋白的 449 個(gè)多肽序列。