目前臨床應(yīng)用或?qū)嶒炇已芯克玫拿乐薮篌瓜x體多為傳統(tǒng)工藝沸水或乙醇燙殺,而美洲大蠊中蛋白質(zhì)類物質(zhì)占主要成分,研究證明也為有效物質(zhì),蛋白質(zhì)受熱易分解、變性,可能會影響藥效。 采用美洲大蠊活體進行實驗,是本實驗的特色,相對于購買的干燥蟲體,用美洲大蠊新鮮蟲體可以較大程度地保
留蟲體中的各種有效物質(zhì),避免蟲體在儲存過程中因環(huán)境或時間等因素導(dǎo)致蟲體發(fā)霉或產(chǎn)生其他變化。 本文以得率、含水量、醇浸出物含量及蛋白質(zhì)含量為理化指標(biāo),以體外抗腫瘤實驗為活性指標(biāo),研究傳統(tǒng)干燥、真空干燥、冷凍干燥對蛋白質(zhì)含量及體外抗腫瘤細胞增殖的影響。
實驗室儀器
HWS-24型電熱
恒溫水浴鍋(上海一恒科學(xué)儀器有限公司),DZF-6050MBE 型真空干燥機(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠),F(xiàn)XB101-0 型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海樹立儀器儀表有限公司),F(xiàn)A2004電子天平(上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司),UV-6000 型紫外分光光度計(上海元析儀器有限公司),HNY- 恒溫培養(yǎng)振蕩器(天津市歐諾儀器儀表有限公司),TDD5M 型醫(yī)用離心機(長沙平凡儀器儀表有限公司),HFsafe-1200TE 型生物安全柜(上海力申科學(xué)儀器有限公司),HF90 型二氧化碳培養(yǎng)箱(上海力申科學(xué)儀器有限公司)。
由實驗可知,真空制的含水量最高,為 3.473%,可能因其在干燥過程中一直處于封閉環(huán)境中,故美洲大蠊蟲體中的水分無法完全排到外界,以致部分水分殘留在蟲體中;烘干制因使用了鼓風(fēng)機,便于儀器內(nèi)部與外界的空氣流通,故美洲大蠊蟲體中水分含量有所降低;冷凍干燥可使美洲大蠊中的水分瞬間升
華,故明顯降低蟲體的含水量。
討論
目前,對于美洲大蠊的前處理工藝,已有初步的研究,低溫炮制美洲大蠊已成為研究人員的共識。本實驗采用先凍殺美洲大蠊,再對其進行冷凍干燥和真空干燥兩種方式的比較,最大程度地減少溫度對蟲體的影響。 由實驗結(jié)果可知,凍干的美洲大蠊蛋白質(zhì)含量高于傳統(tǒng)制美洲大蠊,可能與低溫能較好保留美洲大蠊中蛋白質(zhì)類物質(zhì)的完整性有關(guān),而傳統(tǒng)制美洲大蠊在燙殺的過程中溫度過高,可導(dǎo)致其蛋白質(zhì)類成分瞬間變性,故檢測量較低;真空制的美洲大蠊在等質(zhì)量的情況下,蛋白質(zhì)含量最高,可能由于減壓干燥過程是在 35 ℃環(huán)境下進行,部分蛋白質(zhì)能夠在其酶的作用下分解,產(chǎn)生更多的短肽或者氨基酸,因而使蛋白質(zhì)含量增加。本實驗采用考馬斯亮藍法對前處理工藝進行了方法學(xué)考察,結(jié)果表明該處理方法具有一定的可行性,符合樣品分析方法的要求,但也存在不足,比如未考察其他蛋白質(zhì)含量測定方法對美洲大蠊中蛋白質(zhì)含量的影響,故不能確定該法是測定美洲大蠊中蛋白質(zhì)含量的最有效方法,因而下一步實驗可增加不同蛋白質(zhì)含量測定方法對美洲大蠊中蛋白質(zhì)含量的影響,優(yōu)選出最佳測定方法。