材料和方法
清開靈注射液購自吉林省集安 益盛藥業(yè);利巴韋林注射液購自杭州民生藥業(yè);細胞 生 長 液(10% FBS DMEM):DMEM、FBS 購 自 Life Technologies;細胞維持液(2% FBS DMEM);噻唑藍 (MTT)購自Sigma;二甲基亞砜(DMSO)購自天津市富 宇精細化工有限公司;DENV-1核酸檢測試劑盒購自 深圳澳東檢驗檢測科技有限公司;病毒 RNA 提取試 劑盒購自QIAGEN公司。備 倒置顯微鏡(奧林巴斯,日本)、實 時熒光定量PCR(羅氏,美國)、恒溫培養(yǎng)箱(上海一恒科技有限公司)、二級生物安全柜(Thermo Fisher Sci? entific,美國),酶標(biāo)儀(BioTek,美國)等。
結(jié) 果
病毒對照組的細胞存活率為 (49.4±4.5)%;病毒經(jīng)稀釋至 1/32(3.13 mg/mL)、1/64 (1.56 mg/mL)和 1/128(0.78 mg/mL)的利巴韋林處理 后,感染細胞的細胞存活率分別增加至(98.7±0.5)%、 (80.2±5.4)%和(77.5±2.7)%,與病毒對照組相比差異 有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),引起細胞病變效應(yīng)明顯減弱; 病毒經(jīng)稀釋至 1/64、1/128和 1/256的清開靈注射液處 理后,感染細胞的細胞存活率分別增加至(76.9 ± 3.5)%、(72.5±2.5)%和(63.0±1.5)%,與病毒對照組相 比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。清開靈注射液恢復(fù)細 胞存活率的能力不及利巴韋林,但與病毒對照組相比 細胞的存活率明顯增加,病毒引起的病變效應(yīng)降低。利巴韋林在稀釋至 1/32(3.13 mg/mL)和 1/64 (1.56 mg/mL)濃度時,清開靈注射液在稀釋至 1/64 和 1/128濃度時,NS1蛋白的表達量與病毒對照組相 比都明顯降低( P<0. 05),且存在劑量依賴性,由此可 見,利巴韋林和清開靈注射液明顯抑制了 DENV-1 中NS1蛋白的表達。