1 材料與方法
精密分析天平(SBA224S,Sartorius公司);電 子天平(SBA2202S-CW,上海山岳科學(xué)儀器有限公 司);薄層色譜掃描儀(KH-2000,上海添時科學(xué)儀 器有限公司);可見分光光度計(722S,上海金梟科學(xué)儀器有限公司);磁力攪拌器(EMS-8C,上海旌 派儀器有限公司);IKA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RV 10,艾卡 儀器設(shè)備有限公司);電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(DHG9053,上海一恒科學(xué)儀器有限公司)。精確稱取2份5.00 g阿魏酸于圓底燒瓶,加23.94 g 甘油,1份溶于10 mL二甲基亞砜中,另1份無溶劑, 分別取反應(yīng)物總質(zhì)量的10%固定化酶加入上述圓底 燒瓶攪拌均勻,置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中,轉(zhuǎn)速采用70 r/ min,在60 ℃下反應(yīng)10 h。反應(yīng)完畢后,用100 mL甲 醇分兩次萃取,置于錐形瓶中封口,取0.5 μL樣品, 采用薄層色譜檢測進行定量分析。
2 結(jié)果與分析
在合成阿魏酸甘油酯的研究中,考慮通過反應(yīng)體 系的構(gòu)建和反應(yīng)器的選擇實現(xiàn)副產(chǎn)物乙醇的及時去 除,并篩選出對脂肪酶活性抑制較小且底物混溶程度 較好的有機溶劑。無論是有機溶劑體系還是無溶劑體 系,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中的酶催化活性較好,這主要由于 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀可以去除副產(chǎn)物乙醇,避免其對酶活性的 抑制作用和促進反應(yīng)向正反應(yīng)方向進行。由于阿魏酸 和甘油在有機溶劑中的溶解度較差,因此,在旋轉(zhuǎn)蒸 發(fā)儀中無溶劑體系下固定化脂肪酶Novozyme 435催化 阿魏酸的轉(zhuǎn)化率最高,為85.30%。DPPH是一種比較穩(wěn)定的自由基,而且它的使用 最為廣泛,常用來評價物質(zhì)的抗氧化能力。試驗 中,采用不同濃度阿魏酸樣液及阿魏酸甘油酯來測 定對DPPH自由基清除能力,根據(jù)抑制率來判斷其抗 氧化能力。
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