養(yǎng)血補元合劑由黃芪、白芍、當歸、川芎、麩炒 白術(shù)等多味中藥材組成，具有氣血雙補，助陽固衛(wèi)的 功效，用于久病失治、病后氣血兩虧或失血過多，以 致氣血兩虛，臨床上多用于術(shù)后失血引起的貧血，癥 見面色蒼白或萎黃，頭暈?zāi)垦?，四肢倦怠，氣短懶言?心悸怔仲，飲食減少，舌淡苔薄白，脈細弱或虛大無力。 方中白芍，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經(jīng)。具有養(yǎng) 血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗、平抑肝陽的功效。

1 儀器與試藥

ZF-20D 型暗箱式紫外分析儀，DYQC 型醫(yī)用超聲波提取器，SHIMADZU AUW120D 電子天平，DHG9140型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科技有限公司）， 硅膠 G 板（青島海洋化工廠分廠）。丹參對照藥材 （批號 120923-201615）、丹參酮Ⅱ A（批號 110766- 201520）、白術(shù)對照藥材（批號 120925-201611）、半 夏對照藥材（批號 121272-201605）、芍藥苷（批號 110736-201640）購于中國藥品生物制品檢定所。養(yǎng)血 補元合劑樣品（批號 170326、170327、170328 ）由陜 西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院制劑室生產(chǎn)提供；甲醇、 磷酸、乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

2 薄層色譜鑒別

2.1 黃芪的薄層色譜鑒別養(yǎng)血補元合劑

30 mL， 蒸干，殘渣加甲醇 30 mL，加熱回流 1 h，濾過，濾液 緩慢加于中性氧化鋁柱（100 ～ 120 目，5 g，內(nèi)徑為 10 ～ 15 mm）上，用 200 mL 的 40 % 甲醇洗脫，收集 洗脫液，置水浴鍋上蒸干，精密量取 30 mL 水使殘渣 溶解，用水飽和正丁醇溶液 20 mL，振搖提取 2 次， 收集正丁醇液，用水洗滌 2 次，每次量取 20 mL 水， 收集正丁醇液，水浴蒸干，精密移取甲醇 1 mL，使 殘渣溶解，即為供試品溶液。稱取黃芪對照藥材粉末 3 g，加甲醇 20 mL，黃芪對照藥材溶液的制備方法同 上。照薄層色譜法（《中國藥典》2015 年版四部通則 0502）試驗，吸取養(yǎng)血補元合劑供試品溶液、黃芪對 照藥材溶液各 5 μL，分別點于同一硅膠 G 薄層板上， 以石油醚（60 ～ 90℃）- 三氯甲烷 - 乙酸乙酯（2:1:1） 溶液為展開劑，展開，取出，晾干，5% 香草醛硫酸溶 液為顯色劑，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜 中，可見橙色的斑點與對照藥材相對應(yīng)，且位置相同。 見圖 1。

2.2 麩炒白術(shù)的薄層色譜鑒別

取養(yǎng)血補元合劑 30 mL，水浴蒸干，加正己烷 25 mL，置超聲儀中， 25 min 后取出，濾過，濾液即為養(yǎng)血補元合劑供試品 溶液。稱取白術(shù)對照藥材 0.5 g，加正己烷 2 mL， 白術(shù)對照藥材溶液制備方法同上。照薄層色譜法 （《中國藥典》2015 年版四部通則 0502）試驗，吸 取養(yǎng)血補元合劑供試品溶液、白術(shù)對照藥材溶液各 10 μL，分別點于同一硅膠 G 薄層板上，以石油醚 （60 ～ 90℃）- 乙酸乙酯（50:1）為展開劑，展開， 取出，晾干，5% 香草醛硫酸溶液為顯色劑，加熱使斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，并應(yīng)顯有一桃 紅色主斑點（蒼術(shù)酮）。

2.3 當歸、川芎的薄層色譜鑒別

取養(yǎng)血補元合劑 溶液 30 mL，水浴蒸干，量取并加入乙醚 20 mL，置于 超聲儀，超聲 10 min，收集濾液蒸干，精密移取乙醇 1 mL 使殘渣溶解，作為養(yǎng)血補元合劑供試品溶液。稱 取當歸、川芎對照藥材各 0.5 g，當歸、川芎對照藥材 溶液的制備方法同上。照薄層色譜法（《中國藥典》 2015 年版四部通則 0502）試驗，吸取養(yǎng)血補元合劑供 試品溶液、當歸、川芎對照藥材溶液各 10 μL，分別點 于同一硅膠 G 薄層板上，以正己烷 - 乙酸乙酯（4:1） 為展開劑，展開，取出，晾干，紫外光燈（365 nm） 下檢視。供試品色譜中，可見相同顏色的熒光斑點與 對照藥材相對應(yīng)，且位置相同。見圖 2。


3 芍藥苷的 HPLC 法測定

色譜柱為：Angilent C18（5 μm， 250 mm×4.6 mm）；流速：1.0 mL/min；流動相：乙 腈 -0.1% 磷酸溶液（14:86），柱溫：30℃，檢測波長 為 230 nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計應(yīng)不低于 3 000。取同一批號（批號160315）樣品6份， 分別制備供試品溶液，每次進樣 10 μL 測定，結(jié)果芍藥 苷平均含量為122.60 μg/mL，RSD為1.99%，結(jié)果見表4。 3.10 加樣回收率試驗 精密稱取同一批養(yǎng)血補元合 劑（批號 160315）9 份，已知芍藥苷 122.60 μg/mL，分 別精密加入一定量的芍藥苷對照品溶液，進行測定， 并計算回收率，結(jié)果平均回收率為 98.22%，RSD 為 1.00%。取養(yǎng)血補元合劑供試品（批號 160315），按上述供試品制備方法制備供試品溶液， 精密吸取 10 μL，連續(xù)進樣 5 次，按上述條件測定峰面置具塞錐形瓶中，精密量取并加入稀乙醇20 mL，密塞， 稱定重量并記錄，超聲處理40 min，放冷，再稱定重量， 用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4 討論

制備方法的確定：精密量取三 份養(yǎng)血補元合劑各 5 mL，分別置于兩個 25 mL 容量 瓶及圓底燒瓶中，加稀乙醇至刻度，圓底燒瓶中加入等量的稀乙醇，精密稱定并記錄重量，兩個容量瓶放 入超聲儀中，超聲 30 min、40 min，圓底燒瓶加熱回 流 30 min，提取完畢后，取出、放涼，精密稱量，用 稀乙醇補足損失的重量，充分搖勻、過濾、取續(xù)濾液， 即為供試品溶液。檢測三種供試品溶液中芍藥苷的含 量，結(jié)果顯示，超聲 30 min 制備的養(yǎng)血補元合劑供試 品溶液中芍藥苷的含量與超聲 45 min 制備的供試品中 芍藥苷的含量幾乎相同，而且高于圓底燒瓶加熱回流 30 min 制備的供試品中芍藥苷的含量。結(jié)果提示：養(yǎng) 血補元合劑超聲 30 min，芍藥苷已經(jīng)完全提取，其含 量并不隨超聲時間的延長而增加；圓底燒瓶加熱回流 30 min 制備的供試品溶液中芍藥苷含量較低，說明加 熱回流法不能完全提取供試品中的芍藥苷，該方法提 取效率低，若采用該方法制備供試品溶液，將會影響 芍藥苷含量的測定。預(yù)實驗結(jié)果顯示，超聲提取可簡 化提取過程，提高提取效率。故選定超聲 30 min 作 為制備養(yǎng)血補元合劑供試品溶液的制備方法。



 

免責(zé)聲明：文章僅供學(xué)習(xí)和交流，如涉及作品版權(quán)問題需要我方刪除，請聯(lián)系我們，我們會在第一時間進行處理。