隨著輔助生殖技術(shù)的飛速發(fā)展,多胎妊娠率也 逐年增高,從而導(dǎo)致母嬰并發(fā)癥也越來越多。單 胚胎移植作為降低多胎妊娠的有效手段之一,得到 人們越來越多的重視。相對于雙胚胎移植而言,要 保證較好的妊娠結(jié)局,單胚胎移植對移植胚胎的質(zhì) 量要求更高。目前移植胚胎的選擇依據(jù)仍然主要是 形態(tài)學(xué)觀察指標,卵裂球數(shù)目能夠有效的反映胚胎 的發(fā)育速度,可以預(yù)測胚胎活力與妊娠結(jié)局。根據(jù) Istanbul共識,Day2 卵裂 球 數(shù) 目 為 4 細 胞,Day3 卵裂球 數(shù) 目 為 8 細胞的胚胎具有較高的著床能力。同時 Magli等研究指出,Day3的8細胞階 段的胚胎是理想的移植胚胎。然而,臨床上有較多 患者 會 獲 得 發(fā) 育 較 快 的 Day3 受 精 胚 胎 (>8 細 胞),這類胚胎移植的妊娠結(jié)局狀況鮮有研究報道。
一、研究對象
對2014年4月至2017年5月在南京鼓樓醫(yī)院 生殖中心行常規(guī)體外受精(IVF)單分裂胚移植的患 者資料進行回顧性分析?;颊呒{入標準:
(1)因盆腔 輸卵管因素行IVF助孕;
(2)常規(guī)IVF 周期;
(3)獲卵數(shù)為5~15枚;
(4)月經(jīng) 第3日 FSH<12 U/L;
(5)女方年齡<40歲;(6)周期數(shù)<2個;
(7)常規(guī)促 排卵方案。
排除標準:
(1)PGS/PGD 周期;
(2)供 卵周期;
(3)男性因素不育;
(4)移植日內(nèi)膜<8mm。 根據(jù)第3天移植胚胎的卵裂球數(shù)目分為8~9 細胞組(n=168)、10~11細胞 組(n=36)、12~16 細胞組(n=30),且10~11細胞 組、12~16細胞 組 中均無符合優(yōu)質(zhì)胚胎篩選條件的8~9細胞胚胎。
二、研究方法
1.TLI系統(tǒng):本研究所采用的時差成像系統(tǒng)是 PrimoVisionTLI(Vitrolife,瑞典),它是 將 培 養(yǎng) 箱與胚胎倒置顯微鏡相結(jié)合,通過數(shù)據(jù)線將胚胎發(fā) 育過程中所采集到的圖片傳輸?shù)脚囵B(yǎng)箱外的顯示器 上,拍照 頻 率 為5min/次,能夠 有 效 地 監(jiān) 測 胚 胎 發(fā) 育的整個過程。此培養(yǎng)系統(tǒng)有自己專用的集合培養(yǎng) 皿(WOW),WOW 是一種9孔培養(yǎng)皿,每個孔都有 自己獨立的數(shù)字編號,便于胚胎學(xué)家區(qū)分。
2.配子的采集與胚胎培養(yǎng):采用常規(guī)促排卵方 案,B超監(jiān)測 卵 泡 生 長,待 主 導(dǎo) 卵 泡 直 徑 達 到18~ 20mm后注射 HCG(珠海麗珠制藥),36h后行陰道 B超引導(dǎo)下卵泡穿刺取卵術(shù)。獲卵3h后,采用短時 受精法,將采集到的人卵母細胞與精子按1∶10000 的比例混合加入IVF(Vitrolife,瑞典)微滴中,共同 孵育5h后機械剝除顆粒細胞,通 過 觀 察 第 二 極 體 是否釋放來判斷受精情況,之后將受精卵轉(zhuǎn)移至含 有 G1(Vitrolife,瑞典)培養(yǎng)液的 WOW 集合培養(yǎng)皿中,置于 PrimoVisionTLI系統(tǒng) 培 養(yǎng) 觀 察 到 第3d 進行移植。
3.胚胎評估:根據(jù)Istanbul共識對分裂期胚胎 質(zhì)量進行評分。以授精時間為起點,通過時差成像 系統(tǒng)記錄胚胎發(fā)育過程中的卵裂模式與時間參數(shù), 采用本中心建立的胚胎篩選模型進行胚胎篩選。 移植胚胎篩選范圍是:卵裂模式為正常、不均或非軸 性卵裂,且時間參數(shù)符合s2<0.50h (s2=t4-t3, 即停留在3細胞階段時間)、t5<48.93h (5細胞分 裂時間)。如該患者無符合上述篩選條件的胚胎,則 不納入本研究范圍。
4.移植與妊 娠 結(jié) 局
判 定:單胚胎移植周期中, 在 TLI系統(tǒng)中培養(yǎng)到第3天,優(yōu)先移植符合篩選條 件的8細胞胚胎,若無則選取符合篩選條件的卵裂 速度較快 的 胚 胎(≥9 個 細 胞)移植后常規(guī)黃體支 持,2周后檢測血 HCG 當(dāng)血 HCG>5U/L,4~6周 B超檢查見孕囊及胎心為臨床妊娠。 三、統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析,所有計量資料采用 (x珚±s)表示,計 數(shù) 資 料 采 用 率 (%)表示,上海博迅得出組間數(shù)據(jù)采用t檢驗進行比較,各組間率 采用卡方檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
5 結(jié) 果
床資料與結(jié)局 8~9細胞組、10~11細胞組和12~16細胞組 3組 患 者 的 年 齡、體 重 指 數(shù) (BMI)、獲 卵 數(shù)、基 礎(chǔ) FSH、基 礎(chǔ) LH、內(nèi) 膜 厚 度 等 均 無 顯 著 差 異 (P> 0.05);3組間種植率、流產(chǎn)率、活產(chǎn)率亦無顯著差異 (P>0.05)。 患者一般臨床資料與結(jié)局 奇數(shù)組和偶數(shù)組兩組患者的年齡、BMI、獲卵數(shù)、 基礎(chǔ)FSH、基礎(chǔ) LH、內(nèi)膜厚度等均無顯著差異(P> 0.05)。兩組臨床結(jié)局比較,偶數(shù)組的種植率、活產(chǎn)率 均顯著高于奇數(shù)組 (P<0.05)。偶數(shù)組的流產(chǎn)率低 于奇數(shù)組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。