糖尿病已 成 為 嚴(yán) 重 危 害 人 類 健 康 的 世 界 性 公 共 衛(wèi)生問題之一，其根據(jù)發(fā)病原因可分為１型糖尿病、２ 型糖尿病、妊娠糖尿病和特殊類型糖尿病，其 中２型 糖尿病發(fā)病率 相 對 較 高，該 病 不 僅 對 腎 臟、酸 堿 平 衡 和心血管系統(tǒng)等產(chǎn)生嚴(yán)重危害，而且能引發(fā)多種并發(fā) 癥，甚至 導(dǎo) 致 失 明、截 肢 殘 疾、腎 衰 竭 尿 毒 癥 等。因 此，對于２型糖 尿 病 的 預(yù) 防、改善和治療已經(jīng)成為當(dāng) 前醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)。

選取３月齡清潔級雄性昆明小鼠 ５０只，購于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，飼養(yǎng)地點(diǎn)為 安徽科技學(xué)院普通實(shí)驗(yàn)動物房。將小鼠隨機(jī)分為對 照組、模型組和實(shí)驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，每組１０只。

肝素鈉購自深圳市海普瑞 藥業(yè)有限公司，鏈脲佐菌素（ＳＴＺ）購自美國 Ｓｉｇｍａ公 司，酵母硒購自合肥東升牧業(yè)有限公司。ＢＣ－５３００獸 用全自動血 液 細(xì) 胞 分 析 儀 購 自 深 圳 邁 瑞 公 司，ＤＰ７２ 顯微成像系統(tǒng)和 ＣＸ２１ＦＳ１正置熒光顯微鏡購自日本 奧林巴斯公司，ＭＥ３０３Ｅ電子天平購自上海梅特勒－托 利多 公 司，ＲＭ２２３５石 蠟 切 片 機(jī) 購 自 德 國 萊 卡 公 司， ＹＴ－６Ｂ生物組織攤烤片機(jī)購自湖北亞光醫(yī)用電子技 術(shù)有限公司），ＧＨＰ－９１６０隔水式恒溫培養(yǎng)箱購自上海一恒科學(xué)儀 器 有 限 公 司。湯山龍泉牌實(shí)驗(yàn)鼠顆粒飼 料購自南京青龍山實(shí)驗(yàn)動物繁殖場，其中基礎(chǔ)飼料營 養(yǎng)水平：粗蛋白１８．１５％，粗 脂 肪 大 于 或 等 于４．０３％， 粗纖 維 大 于 或 等 于 ５．１２％，粗 灰 分 ７．９４％，鈣 １．４３％；高脂高糖飼料營養(yǎng)水平：２５．０％脂肪，２０．０％ 糖，０．１％膽酸鹽，基礎(chǔ)飼料５４．９％。

實(shí)驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組和模型組飼喂 高脂高糖飼料，４周后腹腔注射ＳＴＺ，誘導(dǎo)構(gòu)建２型糖 尿病模型，第３、７天時(shí)測空腹血糖，血糖值為１６～２０ ｍｍｏｌ／Ｌ時(shí)則為造模成功。對照組為 正 常 健 康 小 鼠， 飼喂基礎(chǔ)飼 料，腹 腔 注 射 等 量 生 理 鹽 水。將５０只 小 鼠穩(wěn)定 喂 養(yǎng) ４ 周 后，實(shí) 驗(yàn) Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 組分別飼喂添加 ０．５、１．０、１．５ｍｇ／ｋｇ的酵母硒飼料，對照組及模型組 飼喂基礎(chǔ)日糧。８周 后 取 材，采 血 前８ｈ禁 食。小 鼠 飼養(yǎng)于全膜終端獨(dú)立通氣籠盒（ＩＶＣ）內(nèi)，飼養(yǎng)管理及 飼養(yǎng)環(huán)境、用 具、ＩＶＣ 清 洗、消 毒 與 滅 菌 均 嚴(yán) 格 按 照 ＩＶＣ標(biāo)準(zhǔn)化操 作 規(guī) 范 進(jìn) 行。小鼠墊料采用福爾馬林 甲醛熏蒸消毒后備用。各組小鼠飼養(yǎng)環(huán)境完全相同： 自由采食和 飲 水，環(huán) 境 溫 度２４～２８ ℃，濕 度５０％～ ６５％。實(shí)驗(yàn)期間觀察并記錄小鼠采食、飲水等情況。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后小 鼠 禁 食、不禁水過夜，乙醚 吸 入 麻 醉，稱 重，摘 眼 球 采 集 抗 凝 血， 使用血液分析儀測定小鼠血液紅細(xì)胞（ＲＢＣ）、白細(xì)胞 （ＷＢＣ）、血 紅 蛋 白 （ＨＧＢ）和 血 小 板 （ＰＬＴ）等 指 標(biāo)。 解剖剝離 脾 臟 和 胸 腺，器 官 稱 重，計(jì)算脾臟和胸腺 指數(shù)。胸腺和脾臟經(jīng)４％多聚甲醛液固定后，梯度乙 醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，切片５μｍ，蘇木 精－伊紅染 色，中 性 樹 膠 封 片，顯 微 鏡 觀 察 并 拍 照。 脾臟和 胸 腺 器 官 指 數(shù) 測 定：器 官 指 數(shù) ＝ 臟 器 重／體 重×１００％。

采用 ＳＰＳＳ２０．０軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分 析，計(jì)量資料以ｘ±ｓ表示，組間比較采用單因素方差 分析，Ｐ＜０．０５為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

各組血細(xì)胞檢測結(jié)果比較 對照組 ＷＢＣ、ＰＬＴ 水平明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜０．０５）； 實(shí)驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組 ＲＢＣ、ＨＧＢ 水平明顯高于模型組和對 照組，且實(shí)驗(yàn)Ⅰ組 ＷＢＣ、ＰＬＴ 水平低于模型組，實(shí) 驗(yàn) Ⅱ、Ⅲ組 ＰＬＴ 水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （Ｐ＜０．０５）。對 照 組、實(shí) 驗(yàn) Ⅰ組胸腺重量和胸腺指數(shù)明顯高于模型組，差異均有 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜０．０５）；實(shí)驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組胸腺重量和胸腺 指數(shù)明顯低于對照組，差 異 均 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義 （Ｐ＜ ０．０５）。對照組和實(shí)驗(yàn) Ⅰ、Ⅱ組脾臟重 量 和 脾 臟 指 數(shù) 明 顯 低 于 模 型 組，差 異 均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜０．０５）；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組脾臟重量和脾 臟指數(shù)明顯高于對照組，差 異 有 統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義 （Ｐ＜ ０．０５）。對 照 組：

（１）胸腺結(jié) 構(gòu) 正 常、皮 質(zhì) 和 髓 質(zhì) 結(jié) 構(gòu) 清 晰、分 界 明 顯， 胸腺皮質(zhì)內(nèi)淋巴細(xì)胞較多且排列緊密，胸腺髓質(zhì)可見 少量的胸腺小體；

（２）脾臟顯微結(jié)構(gòu)正常，白髓和紅髓 結(jié)構(gòu)清晰，脾小結(jié)和動脈周圍淋巴鞘輪廓明顯，其 內(nèi) 淋巴細(xì)胞較多、排列緊密。模型組：

（ 3）胸腺結(jié)構(gòu)出現(xiàn) 異常，呈現(xiàn)退化趨勢，胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)界限模糊，胸腺 皮質(zhì)較薄，淋巴細(xì)胞排列疏松，髓質(zhì)體積明顯增大，淋巴細(xì)胞排列疏松，其間出現(xiàn)較多的空泡樣結(jié)構(gòu)；

（ 4）脾 臟結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異 常，白 髓 和 紅 髓 界 限 模 糊，脾 小 結(jié) 和 動 脈周圍淋巴鞘 數(shù) 量 較 少，體 積 較 小，其內(nèi)淋巴細(xì)胞排 列疏松，可見少 量 空 泡 樣 結(jié) 構(gòu)，部 分 脾 小 結(jié) 內(nèi) 可 見 大 量的斑塊樣 結(jié) 構(gòu)。實(shí) 驗(yàn)Ⅰ組：

（ 5）胸 腺 顯 微 結(jié) 構(gòu) 明 顯 改善，胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰，皮質(zhì)明顯增厚，淋巴 細(xì)胞排列緊密，但 其 中 有 較 多 的 空 泡 結(jié) 構(gòu)，且 髓 質(zhì) 體 積明顯減小，可見少量的胸腺小體；

（ 6）脾臟顯微結(jié)構(gòu) 明顯改善，脾小 結(jié) 和 動 脈 周 圍 淋 巴 鞘 明 顯 較 大，髓 索 增粗，其內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量增多、排列緊密。實(shí)驗(yàn)Ⅱ組： 胸腺顯微結(jié)構(gòu)有所改善，胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)分解明 顯，胸腺皮 質(zhì) 增 厚，淋 巴 排 列 緊 密，胸腺髓質(zhì)體積較 小，淋巴細(xì)胞之間仍見較多的空泡樣結(jié)構(gòu)；

（ 7）脾臟顯 微結(jié)構(gòu)明 顯 改 善，脾小結(jié)和動脈周圍淋巴鞘明顯較 大，其內(nèi)淋巴細(xì)胞排列緊密，未見空泡樣結(jié)構(gòu)，髓索增 粗，髓竇較窄。實(shí)驗(yàn)Ⅲ組：

（ 8）胸腺顯微結(jié)構(gòu)無明顯變 化；

（ 9）脾臟 白 髓 較 小，紅 髓 較 大；脾 小 結(jié) 和 動 脈 周 圍 淋巴鞘明顯較小，但未見有斑塊樣結(jié)構(gòu)。

硒的適量補(bǔ)充可對人體產(chǎn)生明顯的有益影響，其 分為有機(jī)硒和 無 機(jī) 硒，其 中 無 機(jī) 硒 毒 性 較 大，而 有 機(jī) 硒具有低毒性、高生物安全性、良好水溶性、機(jī)體易吸 收等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于保健方面。有 研 究 顯 示，硒 的缺乏可抑制骨骼肌肉系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及免疫 功能，導(dǎo)致兒童身高、體重和智力明顯降低，同時(shí)可導(dǎo) 致胰島素合成分泌相關(guān)型基因及硒蛋白基因表達(dá)失 調(diào)，引起糖代謝及脂質(zhì)代謝紊亂和腦細(xì)胞氧化應(yīng)激， 進(jìn)而誘導(dǎo)阿爾茨海默病的發(fā)生。然 而，適 量 的 補(bǔ) 充硒具有以 下 作 用：

（１）可增強(qiáng)機(jī)體谷胱甘肽過氧 化 物酶和總超氧化物歧化酶活性，促 進(jìn) 氧 自 由 基 的 清 除，抑制其對細(xì)胞的破壞，提高機(jī)體抗氧化功能；

（２）可增加 Ｔ 淋巴細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)細(xì)胞因子的合成分 泌，升高免疫球蛋白 Ｇ 含量，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞 的 吞 噬 活 性，提高機(jī)體免疫功能；

（３）可激活α－酮戊二酸脫氫 酶系，參與輔酶 Ａ、輔酶 Ｑ 的生物合成，調(diào)控人體糖、 脂肪、氨基酸３大營養(yǎng)物質(zhì)分解代謝。本研究通過 在飼料中添加不同劑量的酵母硒，探討了其對２型糖 尿病小鼠血細(xì)胞及免疫器官的影響。