乳酸菌真空冷凍干燥技術是一種將乳酸菌懸液冷凍一定時間后,再提高其環(huán)境中的真空度,使菌體中的水分在低溫高真空度的環(huán)境下升華變成凍干菌粉的干燥方法。由于真空冷凍干燥法制備的乳酸菌發(fā)酵劑具有遺傳穩(wěn)定,發(fā)酵活力高,貯藏條件好等優(yōu)點,成為乳酸菌發(fā)酵劑最常用的制備方法之一。然而乳酸菌在冷凍干燥過程中,不可避免地受到一些損傷,凍干后的菌粉存活率明顯降低。有研究表明,通過優(yōu)化菌株的培養(yǎng)基組成成分,可提高菌株對冷凍干燥的抗性,從而提高凍干存活率。
1儀器與設備
FD-1A-50 真空冷凍干燥機 北京博醫(yī)康實驗儀器有限公司;Technologies6850 氣象色譜儀安捷倫科技有限公司;DM4000B 正置熒光顯微鏡 德國 Leica 公司;UV-1700 紫外分光光度計 日本島津公司。
2 培養(yǎng)基中油酸添加量對菌株凍干存活率的影響
冷凍干燥是一個劇烈的,綜合的脅迫過程,冷凍干燥過程中冰晶的形成會對細胞膜產(chǎn)生機械損傷,破壞細胞膜的完整性。同時,由于水分的升華,細胞液濃縮,細胞外溶質(zhì)濃度升高,形成高滲透壓的環(huán)境;低溫、高滲透壓、缺水的環(huán)境還會引起蛋白質(zhì)的變性、酶的活性降低,DNA超螺旋結(jié)構(gòu)的破壞。
3 結(jié)論
培養(yǎng)基中低濃度(≤0.2g/L)的油酸可以促進植物乳桿菌 LIP-1 生長,提高凍干存活率。培養(yǎng)基中高濃度油酸會抑制菌的生長,最低抑制濃度在0.2-0.3 g/L之間。低濃度油酸可以促進棕櫚酸轉(zhuǎn)化為環(huán)丙烷脂肪酸,同時誘導飽和脂肪酸向不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化,通過這兩條途徑來提高菌體對冷凍干燥的抗性。