甜茶為薔薇科植物甜葉懸鉤子 Ｒubus suavissimus S． Lee 的干燥葉，具有清熱、潤肺、祛 痰、止咳 的 功 效，用 于 痰 多 咳 嗽，或 作 為 甜 味 劑，主要含有黃酮、二萜、鞣花鞣質(zhì)等多 種 成 分，具 有 降 血 糖、降 血 脂、抗 過 敏、抗氧化、抗炎等多種藥理活性，其中甜茶素?zé)崃康?，口感佳，無毒，并且具有降脂、降 壓、降糖等作用，是一種理想的可以取代糖類物質(zhì) 的天然甜味劑，已廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等方面。

1 材料

1. 1 儀器

UltiMate-3000 高效液相色譜儀 ［賽默 飛世爾科技 ( 中國) 有限公司］; AＲ2140 電子天 平 ( 萬分之一) 、EX225DZH 電子天平 ( 十萬分之 一) ［奧豪 斯 儀 器 ( 常 州) 有 限 公 司］; SB5200DT 超聲波清洗機(jī) ( 寧波新芝生物科技股份有 限公司) ; Q-300B 高速多功能粉碎機(jī) ( 上海冰都電器有限公司) ; 電熱鼓風(fēng)干燥箱 ( 上海一恒科學(xué)儀器有限公司) ; WFH-203B 三用紫外分析儀 ( 上 海滬粵明科學(xué)儀器有限公司) ; SHB-Ⅲ循環(huán)水式多 用真空泵 ( 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司) ; S1710111 MODEL5000-507 恒溫控制箱 ( 天津譜祥科技有限 公司) ; DK-98-1 電熱恒溫水浴鍋 ( 天津市泰斯特 儀器有限公司) 。

1. 2 試藥

金絲桃苷 ( 批號(hào) 111521-201708) 、蘆 丁 ( 批號(hào) 100080-201610) 對(duì)照品及甜茶對(duì)照藥材 ( 批號(hào) 121372-200401) 均購于中國食品藥品檢定 研究院。甜茶產(chǎn)地廣西，經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 王世清教授鑒定為薔薇科植物甜葉懸鉤子 Ｒubus suavissimus S． Lee 的 干 燥 葉，具 體 見 表 1。硅 膠 GF254薄層板 ( 100 mm×100 mm，青島海洋化工廠 分廠，批號(hào) 20150603) 。乙腈為色譜純 ( 天津市科 密歐化學(xué)試劑有限公司) ; 其他試劑均為分析純; 水為娃哈哈純凈水。

2 方法與結(jié)果

2. 1 TLC 定性鑒別

取藥材粉末 1. 0 g，置于具塞 錐形瓶中，加 70% 甲醇 25 mL，超聲 30 min，濾 過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液; 取對(duì)照藥材粉末 1. 0 g，同法制成相應(yīng)溶液; 取金絲桃苷、蘆丁對(duì)照品適量，70%甲醇制成每 1 mL 各含 0. 1 mg 兩者 的相應(yīng)溶液。按照 2015 年版 《中國藥典》四部通 則 0502，吸取上述溶液各 10 μL，點(diǎn)于同一硅膠 GF254薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-水 ( 8 ∶ 1 ∶ 1) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 3%三氯化鋁 乙醇溶 液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置 于 紫 外 燈 ( 365 nm) 下檢視，結(jié)果見圖 1。由圖可知，供試 品色譜中在與對(duì)照藥材、對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上， 顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。


3 討論

考察了醋酸乙酯甲酸-水 ( 8 ∶ 1 ∶ 1) 、乙醇-甲酸 ( 50 ∶ 1) 、醋酸乙 酯-乙醇-水-冰醋酸 ( 10 ∶ 5 ∶ 1 ∶ 1) 展開系統(tǒng)，發(fā) 現(xiàn)醋酸乙酯-甲酸-水 ( 8 ∶ 1 ∶ 1) 展開時(shí)樣品分離 度最好，斑點(diǎn)清晰。同時(shí)，還考察了硅膠 GF254薄 層板、聚酰胺薄膜對(duì)展開效果的影響，發(fā)現(xiàn)后者拖 尾嚴(yán)重，而前者可見清晰斑點(diǎn)，分離效果較好，并且是實(shí)驗(yàn)室常用品?？疾炝颂?取溶劑種類 ( 甲醇、70%甲醇、50%甲醇、95%乙 醇、70%乙醇、50% 乙醇) 、提取溶劑用量 ( 15、 25、50 倍) 、提取方法 ( 回流、超聲) 、提取時(shí)間 ( 30、45、60 min) 、提取次數(shù) ( 1、2、3 次) 等因 素，最終確定供試品溶液制備方法為 25 倍量 70% 甲醇回流提取 2 次，每次 45 min。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)首次以金絲桃苷為指標(biāo)成分，建立了甜 茶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有利于該藥材臨床應(yīng)用的有效性和安 全性，也可為其潤肺功效的研究提供參考。