茶炭疽病是我國茶園中常見的主要病害 之一，在高溫高濕天氣發(fā)病較重，在茶葉上可 形成大型斑塊，并造成茶樹大量落葉，該病可 使投產(chǎn)茶園秋茶減產(chǎn) 15%~30%，嚴(yán)重的達(dá)到 40%~50%，造成茶樹產(chǎn)量與茶葉品質(zhì)都下降。 茶樹上登記防治茶炭疽病的殺菌劑有吡唑醚 菌酯、啶氧菌酯、多抗霉素和代森鋅等， 施用化學(xué)農(nóng)藥是目前防治茶炭疽病的主要手 段。目前世界各茶葉進(jìn)口國加強(qiáng)了茶葉農(nóng)藥最 大殘留的限制，使得防治茶樹病害的化學(xué)農(nóng)藥 不宜使用。隨著我國化學(xué)農(nóng)藥減施增效戰(zhàn)略實(shí) 施和茶葉產(chǎn)業(yè)的國際化、現(xiàn)代化、標(biāo)準(zhǔn)化的推 進(jìn)，茶園減施，甚至不施化學(xué)農(nóng)藥也將成為必 然趨勢(shì)。為了有效減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，利用 植物體內(nèi)的次生代謝物質(zhì)對(duì)茶樹病害進(jìn)行防 控是有效的防治途徑之一，其中利用蘆柑皮、 艾蒿等提取物及山蒼子等植物精油來抑制茶 炭疽病成為研究熱點(diǎn)。

99%右旋香茅醇購于上海阿拉丁試劑有 限公司；97%左旋香茅醇[(-)-β-香茅醇]購于上 海薩恩化學(xué)技術(shù)有限公司；無水乙醇（天津市富宇精細(xì)化工有限公司），10%多抗霉素可濕 性粉劑購于山西奇星農(nóng)藥有限公司，吐溫-80 （天津市大茂化學(xué)試劑廠）。超凈工作臺(tái)（蘇 凈集團(tuán)安泰公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一 恒科技有限公司）；電子天平（型號(hào)： BSA224S-CW）；恒溫培養(yǎng)箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）；高溫蒸汽滅菌鍋（上海沉匯儀器有限公司）。 供試菌株：茶炭疽病菌（C. gloeosporioides）， 由貴州省茶葉研究所提供。

采用生長速率法。在藥劑初篩的基礎(chǔ) 上選出 5 個(gè)有效濃度梯度，配置成相應(yīng)的 PDA 毒體培養(yǎng)基，用 5 mm 打孔器在活化好的茶炭 疽病培養(yǎng)皿沿菌絲邊緣打孔，將菌餅放入到培 養(yǎng)皿中央，帶菌絲面與 PDA 培養(yǎng)基面相接觸， 以含 0.1%吐溫-80 和 5%無水乙醇無菌水溶液 作對(duì)照，每個(gè)處理 4 次重復(fù)。茶炭疽病菌株由 貴州省茶葉研究所提供（已純化）；將密封保 存在試管內(nèi)的菌株用接種針挑取少量菌絲轉(zhuǎn) 移到 PDA 培養(yǎng)基中，置于 25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi) 培養(yǎng) 120 h，活化菌株，即可開展下一步試驗(yàn)。 置于 25℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 120 h，采用十字 交叉法測(cè)得菌絲體生長直徑，計(jì)算對(duì)炭疽病病 菌生長的抑制率，求出毒力回歸方程及抑制中 濃度（EC50）。生長抑制率公式： 生長抑制率=(?D1－?D2)/?D1×100% ?D1 為對(duì)照菌落直徑與菌餅直徑的差值， ?D2 為處理菌落直徑與菌餅直徑的差值。

根據(jù) Horsfall 方法設(shè)計(jì)混配比例。以右 旋香茅醇和左旋香茅醇兩種單劑的有效中濃 度 EC50 為基礎(chǔ)，配制兩種單劑化合物的有效 中濃度藥液，按體積比(9︰1)、(8︰2)、(7︰ 3)、(6︰4)、(5︰5)、(4︰6)、(3︰7)、(2︰8)、(1 ︰9)進(jìn)行混合，分別測(cè)定每組混合處理 120 h 后 對(duì)茶炭疽病菌菌絲生長抑制率。根據(jù)體積比測(cè)度 的抑制率選出較好的體積比，先配制單劑濃度梯 度，再按相對(duì)應(yīng)的濃度梯度順序?qū)蓡蝿┌淳哂?增效作用組合的體積比混配，得到增效配比混劑 的濃度梯度。計(jì)算出各單劑和混劑處理后 120 h 的毒力回歸方程及抑制中濃度（EC50）。

根據(jù) Sun 等的方法求出共毒系數(shù)及增效倍數(shù)，共毒系數(shù)大于 120 表示具增效作用， 小于 80 表示拮抗作用，介于 80~120 之間表示 相加作用。以劑量對(duì)數(shù)值（x）為自變量，抑 制率（y）為因變量，采用 DPS 7.05 軟件計(jì)算 毒力回歸方程、抑制中濃度（EC50）、相關(guān)系 數(shù)。共毒系數(shù)的計(jì)算方法參照李建明等的方 法： 共毒系數(shù)（CTC）= 增效組合實(shí)際毒力指數(shù) 增效組合理論毒力指數(shù)。

采用菌絲生長速率法，測(cè)試了香茅醇及其 不同異構(gòu)體（右旋、左旋香茅醇）和 10%多抗 霉素（對(duì)照藥劑）對(duì)茶炭疽病菌的室內(nèi)毒力。結(jié)果表明，經(jīng)過處理后的 120 h，右旋香茅 醇和左旋香茅醇對(duì)茶炭疽病菌的菌絲生長抑制 中濃度 EC50 分別為 (113.27±0.95) mg·L-1 和 (119.87±0.20) mg·L-1 ，均低于香茅醇 [(144.12±0.42) mg·L-1]，而高于對(duì)照藥劑 10% 多抗霉素可濕性粉劑[(105.06±0.32) mg·L-1]。根據(jù)單劑毒力測(cè)定結(jié)果，對(duì)右旋香茅醇和 左旋香茅醇進(jìn)行混配增效配比的定性篩選。結(jié) 果表明（表 2），處理后 120 h，右旋香茅醇 和左旋香茅醇的 EC50 體積配比為(6︰4)、(5 ︰5)、(4︰6)、(3︰7)和(2︰8)時(shí)，對(duì)菌絲生長 的校正毒力比均大于 1，表現(xiàn)為增效作用；配 比為 1︰9 時(shí)，校正毒力比明顯小于 1，表現(xiàn) 出拮抗作用；其他配比的校正毒力比為 1 左右， 表現(xiàn)出相加作用。采用共毒系數(shù)法，對(duì)右旋 香茅醇和左旋香茅醇進(jìn)行混配增效配比的定 量篩選。由表 3 可見，處理后 120 h，右旋香 茅醇和左旋香茅醇的五組質(zhì)量比中，配比為 (1∶1.4)、(1︰3.8)、(1.6︰1)時(shí)，EC50 值分別 為(98.05±9.02) mg·L-1、(95.72±9.40) mg·L-1 和 (89.54±8.21) mg·L-1，共毒系數(shù)分別為 120.57、121.42 和 130.19，均大于 120，表現(xiàn)為增效作 用，分別增效 20.57%、21.42%和 30.19%；另 外兩個(gè)配比的共毒系數(shù)均介于 111~120 之間， 表現(xiàn)為相加作用。通過兩異構(gòu)體不同質(zhì)量配比 后能有效提升對(duì)茶炭疽病的毒力，EC50 值除 配比為 1∶1 配比外均低于對(duì)照藥劑（10%多 抗霉素可濕性粉劑）。

香茅醇及其異構(gòu)體（右旋香茅醇和左旋香 茅醇）對(duì)茶炭疽?。–. gloeosporioides）有著較 好的抑菌效果，EC50 值均在 150 mg·L-1 以下， 與 Nidiry 等的研究結(jié)果基本一致。香茅醇 屬于單萜類化合物，Knobloch 等報(bào)道精油 成分在水中的溶解度直接關(guān)系到它們穿透細(xì)菌或真菌細(xì)胞壁的能力，決定抑菌活性的大小， 根據(jù)這個(gè)理論，在今后實(shí)際加工使用中，可將其 加工成水性化劑型，如微乳劑、水乳劑等，以提 高親水性和抑菌活性。



 

免責(zé)聲明：文章僅供學(xué)習(xí)和交流，如涉及作品版權(quán)問題需要我方刪除，請(qǐng)聯(lián)系我們，我們會(huì)在第一時(shí)間進(jìn)行處理。