青龍衣為胡桃科植物胡桃楸和胡桃的未成熟外果皮。味苦、澀，性平；歸肝、脾、胃經(jīng)；功能主治：止痛、止咳、止瀉、解毒、殺蟲。主治脘腹疼痛、痛經(jīng)、久咳、泄瀉久痢、癰腫瘡毒、頑癬、禿瘡、白癜風(fēng)等癥。早在宋代《開寶本草》就有記載胡桃楸未成熟的果肉皮稱之為青龍衣。近代民間用其治療疼痛癥，也常用來治療癌癥、皮膚病，還可作為止痛劑來應(yīng)用。青龍衣中主要包括醌類、黃酮類、二芳基庚烷類、萜類及其它類，在應(yīng)用HPLC對青龍衣質(zhì)量控制方面主要以胡桃醌為主要指標(biāo)。酚酸類成分廣泛分布在藥用植物中，且具有顯著的藥理學(xué)活性，如抗腫瘤、抗炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗凝血及清除自由基作用。隨著中藥材質(zhì)量控制研究的不斷深入，單一指標(biāo)已無法反映中藥材的整體質(zhì)量，因此本研究采用HPLC法對青龍衣藥材中的5種酚酸類成分進(jìn)行測定，所建方法準(zhǔn)確、簡單、高效，可以為青龍衣藥材的質(zhì)量控制提供一定的理論基礎(chǔ)及實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)。
1材料
1.1儀器
Agilent1100高效液相色譜儀（美國安捷倫）；DHG-9013A鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒）,紫外檢測器（美國安捷倫）；電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器）；BSA224S和BT25S型分析天平（德國Sartorius 公司）；KQ-3000型超聲波清洗器（江蘇昆山）；粉碎機(jī)（浙江金華）。
1.2試劑
綠原酸（批號：110753-201817）、咖啡酸（批號：110885-201703）、阿魏酸（批號 ：110773-201614），鞣花酸（批號 ：111959-201602）均購于中國藥品食品檢定研究院 ；丁香酸（批號：151020）購于成都普菲德生物技術(shù)有限公司，經(jīng)歸一化法檢測純度≥98%。檢測所用試劑均為色譜純，水為超純水。
1.3藥材
青龍衣藥材采集于遼寧省遼南地區(qū)，經(jīng)大連大學(xué)附屬中山醫(yī)院藥劑科徐保利副研究員鑒定為胡桃科植物胡桃楸的未成熟果實(shí)，經(jīng)低溫干燥后，粉碎，過40目篩，備用。
2方法與結(jié)果
2.1供試品溶液制備
稱取粉碎后過篩的青龍衣樣品粉末1g，精密稱定，利用具塞錐形瓶并在錐形瓶中加80%甲醇50ml，精密稱定，超聲提取30min，放冷，用80% 甲醇補(bǔ)足失去的重量，用0.45μm微孔濾膜過濾，即得。
2.2線性關(guān)系考察
精密吸取綠原酸、咖啡酸、丁香酸、阿魏酸和鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，制備成系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，吸取10μl分別注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定，以對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，對照品鋒面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，
2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)
分別于青龍衣供試品溶液處理后的0、2、4、6、8、10h精密吸取同一供試品溶液10μl，注入HPLC進(jìn)行測定。結(jié)果顯示10h內(nèi)，供試品溶液中綠原酸、咖啡酸、丁香酸、阿魏酸和鞣花酸面積穩(wěn)定，RSD為1.66%、1.61%、1.34%、1.03%、0.83%，表明青龍衣供試品在10h之內(nèi)穩(wěn)定。
2.3重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批青龍衣樣品，稱取6份，精密稱定，按照“2.3”項(xiàng)下的方法進(jìn)行制備，分別精密吸取10μl注入高效液相色譜儀。測得綠原酸、咖啡酸、丁香酸、阿魏酸和鞣花酸含量RSD分別為1.67%、1.65%、1.89%、1.31%、1.28%，方法重復(fù)性良好。
3討論
藥用植物活性成分的含量與種質(zhì)、生態(tài)環(huán)境有著重要的關(guān)系，種質(zhì)取決于基因型，生態(tài)環(huán)境影響活性成分的行程和積累，兩者是影響活性成分含量和組成的關(guān)鍵因素。本研究對不同產(chǎn)地單一來源的胡桃科植物胡桃楸的不成熟果實(shí)（青龍衣）進(jìn)行收集，并通過HPLC法比較了其中5種成分含量的高低，發(fā)現(xiàn)不同地理分布區(qū)域的青龍衣中5種含量的差別較大，這可能與其所處環(huán)境和遺傳因素有關(guān)，并且不同的采收時(shí)間也對其化學(xué)成分的影響也較大。
4結(jié)論
烏靈膠囊聯(lián)合CBZ能夠促進(jìn)機(jī)體對CBZ的吸收，增加其在大鼠血液組織中的濃度，與CBZ起到協(xié)同治療RE的作用，可協(xié)助CBZ更好地發(fā)揮療效，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
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