材料與方法
MLS-3750 型 滅 菌 鍋、STAC-S45F 型 恒 溫 培 養(yǎng)箱, 日本三洋公司;KDC-1044 型低速離心機, 安徽中佳科儀有限公司; 高速離心機, 德國 Eppendorf 公司;恒溫培養(yǎng)箱(DHP-9272 型),上海一恒公司;超低溫冰箱,中國海爾集團公司;pH 計, 瑞 士 Mettler Toledo 公 司 ; 萊 卡 熒 光 顯 微 鏡 DM4000B, 上海徠卡顯微系統(tǒng)貿(mào)易有限公司 ; ZHJH-1214B 超凈工作臺, 南京依貝儀器設(shè)備有 限公司;高壓蒸汽滅菌鍋,日本三洋 MLS-3750;真 空冷凍干燥機,Labconco FreeZone;全自動干熱滅 菌器(ADVANTEC SP-650 型),廣州綠百草科學儀器有限公司。將植物乳桿菌 LIP-1 接 種于脫脂乳培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)活化。待凝乳后再 以 2%的體積分數(shù)接種于優(yōu)化培養(yǎng)基中,37 ℃靜 置培養(yǎng) 18 h。 然后在植物乳桿菌 LIP-1 經(jīng) 37 ℃活 化培養(yǎng) 2 代。
結(jié)果與分析
當初始培養(yǎng) pH 值分別為 6.8 與 7.4 時,發(fā)酵 活菌數(shù)較高,分別為 9.79,9.70 lg(CFU/mL),且無 顯著性差異變化(P>0.05),但凍干存活率分別為 81.76%,72.43%,具有顯著性差異(P<0.05)。 為了 減少影響因素,本研究選擇發(fā)酵菌數(shù)相似,但凍干 存活率存在顯著差異的 2 組進行后續(xù)試驗, 即以 初始 pH 值為 6.8 培養(yǎng)的 LIP-1 作為試驗組,以初 始 pH 值為 7.4 的 LIP-1 作為對照組,來進一步探 究不同初始 pH 值對乳桿菌抗冷凍干燥活性的內(nèi) 在影響機制。試驗組 pH 值降低得更快, 活菌數(shù)增長更多,最后均趨于穩(wěn)定。 研究發(fā)現(xiàn)初始 pH 值對菌株生長的影響與酶的活性密切相關(guān), 適宜的初始 pH 值,可以使酶活性增加,促進菌株 的生長。我們認為 pH 6.8 作為最適初始 pH 值,可 以使植物乳桿菌相關(guān)的酶活性增加,促進其生長。 與本研究相似,詹蘭蘭等研究發(fā)現(xiàn),初始 pH 值 能顯著影響乳酸菌菌株 E2 和 D2 的生長。