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上海一恒

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上海一恒分析蛋白質(zhì)含量差異分析

返回列表 來(lái)源:未知 發(fā)布日期:2019-09-16 10:58【

關(guān)于進(jìn)一步規(guī)范保健品原料管理的通知》〔衛(wèi)法監(jiān)發(fā) (2002)51 號(hào)〕把人參(包括人參、人參葉、人參果)列 入可用保健品食品原料的名單后,人參根、莖、葉正式 作為保健品原料使用。目前,市場(chǎng)上人參類(lèi)的保健品 已有上百種,包括人參酒、人參茶、人參口服液、人參膠 囊、人參含片等。2012 年,衛(wèi)生部批準(zhǔn)人參可以作為 新資源食品使用后,人參根、莖、葉在食品、保健品的 應(yīng)用將有更廣闊的前景。

1 材料與試劑

1.1 材料

在撫松縣榆樹(shù)鄉(xiāng)參場(chǎng),隨機(jī)選取6 個(gè)樣品采摘點(diǎn), 每個(gè)點(diǎn)隨機(jī)抽取 5 組 6 年生人參的根、莖、葉作為試驗(yàn)材料。共計(jì) 30 組人參根、莖、葉樣品。

1.2 試劑

EDTA(意大利 VELP 公司)。

1.3 儀器

NDA701杜馬斯定氮儀(意大利VELP公司);Milli-Q Advantage A10 型超純水器(美國(guó)密理博公司); 
上海一恒DZF-6053臺(tái)式真空干燥箱;MS204S 型天平電子分析天平; S205DU電子天平(瑞士梅特勒托利多儀器有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器工作條件

當(dāng)燃燒反應(yīng)器溫度達(dá) 1 030 ℃以上、還原反應(yīng)器 溫度達(dá) 650 ℃以上、氦氣(純度≥99.99%)壓力達(dá) 200 kPa 以上、氧氣(純度≥99.99%)壓力達(dá) 250 kPa 以 上及氮?dú)猓兌?ge;99.99%)壓力達(dá) 300 kPa 以上時(shí),自 動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系和標(biāo)準(zhǔn)曲線方程

分別稱(chēng)取 EDTA 標(biāo)品 0、12.2、21.7、30.1、41.2、 52.8、62.4、75.4、82.4、93.3、100.3、113.6、122.6 mg,用 錫箔紙包好,經(jīng)制樣器制樣后檢測(cè),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以 總氮質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)、峰面積(mv×s)為縱坐標(biāo)繪制 標(biāo)準(zhǔn)曲線。曲線方程: Y=4.373 955E 3+X×2.935 245E-4,R2=0.999 97。

2.3 樣品制備

鮮參樣品經(jīng)洗刷瀝水后置于 50 ℃烘箱內(nèi)干燥,粉 碎后過(guò) 80 目篩,密封留存待用。以 EDTA 作為檢測(cè)時(shí) 的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在測(cè)定前,所有樣品以及 EDTA 標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)均在 70 ℃烘箱內(nèi)再次干燥 72 h,置于干燥器內(nèi),待測(cè)。準(zhǔn)確稱(chēng)取干粉樣品,用錫箔紙包好,壓縮空氣。

2.4 儀器精密度

以標(biāo)準(zhǔn)品 EDTA 作為樣品,在上述測(cè)定條件下連 續(xù)測(cè)定 11 次,RSD 值為 0.317%(n=11),結(jié)果表明,儀 器精密度良好。


2.5 重復(fù)性

隨機(jī)選取一個(gè)樣品的根、莖、葉,分別重復(fù)測(cè)定 6 次,統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,數(shù)據(jù)均符合 X∈X±2s,根蛋白質(zhì)含 量的平均值為 15.851%,RSD 為 0.322%;莖蛋白質(zhì)含 量的平均值為 8.561%,RSD為 0.341%;葉蛋白質(zhì)含量 的平均值為 12.704%,RSD 為 0.326%。說(shuō)明該試驗(yàn)方 法的重現(xiàn)性良好。

2.6 加樣回收率

取已知含量的人參根、莖、葉粉末作為樣品,各稱(chēng) 取 2 個(gè)樣,分別加入EDTA0.8、2.4、4.6、7.2、9.0、10.4mg。 制樣后按照“2.1”項(xiàng)下條件測(cè)定,統(tǒng)計(jì)結(jié)果,平均回收 率達(dá) 99.83%。

2.7 樣品含量測(cè)定

30 組樣品制備完成后,置于自動(dòng)進(jìn)樣盤(pán)上。按照 “2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)行蛋白質(zhì)含量測(cè)定,每個(gè)樣品平行測(cè) 定 3 次。采用杜馬斯定氮儀可自動(dòng)計(jì)算出含氮量,運(yùn) 用公式蛋白質(zhì)含量=含氮量×6.25 計(jì)算出蛋白質(zhì)含量, 蛋白質(zhì)含量為 3 次平行測(cè)定的平均值。利用 Excel 及 SAS 9.2 統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)中的單因素方差分析程序?qū)Φ鞍?質(zhì)含量進(jìn)行方差分析和單因素比較。

2.7.1 樣品點(diǎn)間蛋白質(zhì)含量比較

6 個(gè)樣品組間根、 莖中蛋白質(zhì)含量無(wú)顯著差異;葉中樣品 1、4、5、6 間無(wú) 顯著差異,但顯著高于樣品 2,樣品 1、3、4、5 間無(wú)顯著 差異,樣品 2、3 間無(wú)顯著差異(表 1)。

2.7.2 不同部位蛋白質(zhì)含量比較

將每個(gè)樣點(diǎn)間的人 參根、莖、葉蛋白質(zhì)含量進(jìn)行比較(圖 1)發(fā)現(xiàn),除樣點(diǎn) 5 外,其余樣點(diǎn)根、莖、葉蛋白質(zhì)含量均存在顯著差異, 表現(xiàn)為根>葉>莖;樣點(diǎn) 5 根、葉中蛋白質(zhì)含量顯著高 于莖,根與葉的蛋白質(zhì)含量無(wú)顯著差異;根部蛋白質(zhì)含量為 14%~15%,莖部蛋白質(zhì)含量為6%~8%,葉部蛋白 質(zhì)含量為10%~14%,根部蛋白質(zhì)含量顯著高于葉部蛋 白質(zhì)含量,葉部蛋白質(zhì)含量顯著高于莖部蛋白質(zhì)含量; 根部與莖部蛋白質(zhì)含量在不同樣點(diǎn)間較穩(wěn)定,葉部蛋 白質(zhì)含量在不同樣點(diǎn)間變化較大。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明,6 個(gè)采樣點(diǎn)間人參根和莖的蛋白 含量無(wú)顯著差異,而 6 個(gè)采樣點(diǎn)間葉部蛋白質(zhì)含量差 異顯著,可能是由于葉片為采樣時(shí)期的主要生長(zhǎng)組織, 各植株生長(zhǎng)狀態(tài)有所不同,也可能是光照等環(huán)境因素 造成的;而任一組內(nèi)蛋白質(zhì)含量個(gè)體之間無(wú)顯著差異; 但同一人參樣品的根、莖、葉間存在顯著差異。




 


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